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| H1與U6 |
| 發布時間:2019-05-18 21:33:36 | 瀏覽次數： |
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| H1與U6。 pSUPER RNAi系統的一個關鍵組成部分是H1 RNA聚合酶III啟動子，它驅動內源性shRNA的產生。當其他RNAi載體系統使用U6啟動子時，荷蘭癌癥研究所的研究表明H1比其他polIII啟動子具有明顯的優勢。 POL III推進器的優勢。 與大多數RNA pol III啟動子不同的是，III型RNA pol III啟動子不需要額外的序列元件，因此是siRNA體內傳遞系統的良好候選者。由III型RNA pol III啟動子轉錄的最豐富的細胞RNA是U6小核RNA(在早產RNA的加工過程中起關鍵作用)、7SK RNA(RNA聚合酶II延伸因子TEFb的負調控因子)和H1 RNA(RNase P的一個組成部分)。 H1優勢。 研究了4種不同的RNA聚合酶III啟動子對由聚合酶II啟動子驅動的異源基因表達的潛在負面影響。人HBV和7SK啟動子對LGFP的表達無非特異性干擾，而鼠和人U6啟動子對LGFP的表達有較強的干擾作用，在一定程度上，人U6啟動子對LGFP的表達有較強的干擾作用。小鼠U6啟動子的毒性已被證實。 此外，H1啟動子為shRNA靶向設計提供了更大的靈活性。在大多數情況下，類U6啟動子的+1核苷酸總是鳥苷，而H1啟動子的+1核苷酸是腺苷。有趣的是，在H1表達的莖環序列中，將+1腺苷改變為尿苷、胞苷或鳥苷并不會影響基因沉默，這表明H1啟動子在+1序列變化方面可能比U6啟動子更靈活。 因此，在隨后的實驗中使用人類H1啟動子來評估pSUPER RNAi系統的基因沉默潛力，并獲得了非常成功的結果2，3。 穩定的shRNA或microRNA抑制。 pSUPER RNAi系統使研究人員能夠進行長期實驗，研究阻斷細胞和整個有機體內特定蛋白質或微RNA的產生的效果，從而為防治艾滋病毒、癌癥和其他遺傳疾病等許多疾病提供新的治療武器。 通過長達兩個月或更長時間的沉默效應，這一新系統還釋放了功能基因組學用于目標驗證和藥物發現的力量，這是基因對藥物途徑中的兩個關鍵組成部分。 PSUPER遺產。 2002年4月，著名的“科學”雜志上發表了一篇論文，首次描述了最初的pSUPER矢量。它的影響如此之大，以至于收到了前所未有的1500項研究科學家的請求，要求在該載體被出售之前就獲得該載體用于他們自己的研究。 因此，pSUPER載體正在成為世界各地實驗室中shRNA、microRNA和X-miR microRNA抑制子的標準載體，為人們深入了解廣泛的疾病-從阿爾茨海默氏癥和帕金森氏癥等神經退行性疾病，到艾滋病毒和肝炎等傳染病，到癌癥和其他基于基因的疾病-提供了深入的信息。 1。Tuschl，T.，“自然生物技術”20，446(2002)。 2。T.R.Brummelkamp，R.Bernard，和R Agami，Science 296，550(2002)。 3。T.R.Brummelkamp，R.Bernard，和R Agami，“癌細胞”2：3，243-247(2002年) |
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